2022-05-09
最近网络上NADC34这个名词出现的概率很高,于是编者查阅了一些文献,了解到该毒株最早在美国发现,后来传入中国,目前与国内的其他蓝耳毒株发生了重组;NADC34在中国的感染率逐年飙升,大有与NADC30、HP-PRRSV三分天下之势;该毒株目前主要流行于北方省份,南方省份尚未报道;该毒株导致母猪流产和仔猪死亡,母猪流产率在0-25%不等,仔猪死亡率10-80%不等,并发现NADC34与3系毒株QYYZ发生了重组,仔猪致死率在40%(2/5);对于产房仔猪蓝耳检测,睾丸液相比血清、断尾液、乳房擦拭物,阳性率更高。以下为详细报道。
一、NADC34的命名
所谓NADC,全称是National Animal Disease Center,是指美国农业部下属的国家动物疫病中心,该机构将分离到的PRRS毒株按照时间顺序进行命名,NADC+序号,大家所熟知的NADC30即来源于此。2013-2015 年,NADC34-like PRRSV 在美国爆发流行,2017年,中国首次报道于,辽宁省检测到NADC34-like PRRSV。
二、NADC34毒株的特征
类NADC34样在VR2332 NSP2蛋白对应的328-427位中有100aa的缺失。如下图1所示中红色方框,前10株为中国分离的类NADC34,IA/2014/NADC34和NADC30毒株为美国报道,JXA1和VR2332为高致病性PRRSV和经典PRRSV的代表毒株。
NAD434缺少氨基酸
图1:中国NADC34在NSP2上100个氨基酸缺失
三、NADC34近年的检出率飙升至28.6%
Xu H[1]对中国类NADC34 PRRSV的流行情况进行监测,结果显示近年来类NADC34 PRRSV检出比例持续增加,2017-2019年,这类毒株的阳性占比不到3%,2020年飙升至11.5%,2021年达到惊人的28.6%,已经与NADC30-like(35.4%)和HP-PRRSV(31.2%)一同成为我国部分地区的主要流行毒株之一。下图红色代表NADC34、黄色代表NADC30、绿色代表高致病性蓝耳。
图2:NADC34毒株2017-2021的阳性率和数量
目前已分离出NADC34毒株的省份有黑龙江、河南、山东、河北、吉林、江苏、辽宁,主要集中在北方,因此南方省份需要密切关注该毒株的流行趋势。
四、NADC34与其他毒株重组后致病性
4.1NADC34与不同PRRSV毒株重组后致病性
Hongyan Bao[2]等在文章《Emergence and spread of NADC34-like PRRSV in China》综合多篇NADC34文献报道,对发生重组的NADC34在猪场的临床症状进行总结,不同重组导致的损失率不同,母猪流产率在0-25%不等,仔猪死亡率10-80%不等,其中来源于黑龙江命名为PRRSV-ZDXYL-China-2018-2的毒株,能导致80%的仔猪死亡。不同NADC34之间的致病性差异可能归因于与不同PRRSV毒株的重组模式的不同。到目前为止,还没有关于NADC34在母猪和母猪中的实验感染的报道。如下图3所示。
图3:中国类NADC34的报道综述
4.2 NADC34与3系毒株QYYZ-like重组后的致病性
Ying-Feng Sun等[3]于2021年从中国天津市某猪场仔猪中分离出一种发病率(75%)和死亡率(40%)的PRRSV毒株TJnh2021。分析显示,TJnh2021高度同源于NADC34-like的ORF1ab-ORF2和ORF6-ORF7编码区,以及QYYZ-like的ORF3-ORF5,暗示存在自然重组事件。重组分析显示,重组事件发生在1.5和3之间的两个谱系间ORF2(nt12196)和ORF5(nt13628)的两个断点(参考VR-2332菌株)。动物实验表明,与中国报道的其他类NADC34相比,TJnh2021致仔猪死亡率为40%,具有更高的致病性。综上所述,类NADC34与中国毒株进行了基因重组。
注:QYYZ毒株是华南地区感染率较高的一种蓝耳毒株,可能来源于台湾省。
图4:TJnh2021与具有代表性的猪繁殖和呼吸综合征病毒(PRRSV)谱系的重组特征。
(图解:纵坐标为相似度,红色波浪线代表NADC34、蓝色波浪线代表QYYZ。图中TJnh2021毒株与红色波浪线高度同源,但在两条红线分别位于ORF2(nt12196)和ORF5(nt13628),蓝色波浪线突然升高,说明在这个阶段出现了NADC34与QYYZ的重组。)
重组毒株TJnh2021感染仔猪后致死率40%(2/5)
TJnh2021接种组仔猪直肠温度从感染后3天开始出现发热(下图a),并表现出明显的临床症状,包括咳嗽、厌食、体耳红色变色。在TJnh2021接种组中,5头仔猪中有2头在10和12天时死亡(下图b)。所有感染仔猪在3、7、10天时采集的血清样本均为PRRSV阳性。对照组仔猪PRRSV仍呈阴性,整个实验过程中无明显临床体征。
图5:仔猪接种TJnh2021后直肠温度和死亡率
注:华南区域感染类QYYZ毒株的比例很高,一旦猪场引入NADC34毒株,该毒株与猪场流行毒株重组,仔猪致死率可能达到40%。
五、猪场NADC30、NADC34混合感染后的仔猪死亡
Chao Li [4]从2020年至2021年对中国黑龙江省一个多种PRRSV共存的育肥猪场持续监测病,在150天内的发病期内,共有412/3400头猪死亡,死亡率为12.12%,对病原的持续监测显示,NADC30、NADC34是该场的优势毒株;在猪发病死亡高峰期,NADC34的检出率也达到了高峰期,如下图6所示红色方框。以上结果表明,NADC30和NADC34与该猪场猪仔的死亡密切相关,而非高致病性蓝耳毒株。
图6:死猪数量和病毒亚型的统计
六、蓝耳病毒在睾丸液中阳性率高
Carles Vilalta[5]等试图通过评估血清、睾丸液、断尾液、母猪乳房擦拭物等样本的蓝耳载量,来准确地确定一窝产仔的PRRSV状态,结果显示:睾丸液比其他样本具有更高的检出率,如下图7所示(图片经过编者翻译):最有意思的是10号母猪,其子代母猪和公猪血清检测均为阴性,但睾丸液阳性、断尾液阴性、乳房擦拭物阴性。该结果证明睾丸液是检测仔猪蓝耳感染的理想样本。
图7:PRRSV 在不同样本中的RT-PCR检测结果
七、小结
1.NADC34有替代NADC30成为中国感染率最高蓝耳毒株的趋势;
2.NADC34目前在北方省份流行,南方省份尚未有报道,南方省份要密切关注该毒株的流行趋势;
3.NADC34毒株与不同蓝耳的重组导致的损失不同,其中与3系QYYZ毒株的重组导致仔猪致死率为40%,华南地区广泛流行QYYZ毒株,因此需要严密防控NADC34毒株进入猪场发生重组;
4.随着NADC30样PRRSV在我国的发展,未来NADC34PRRSV可能与国内PRRSV菌株发生重组,这可能导致更广泛的地理分布,对我国养猪业构成更严重的威胁。
5.猪场检测PRRSV,可以采集睾丸样本。
参考文献:
[1] Xu H, Li C, Li W,et al. Novel characteristics of Chinese NADC34-like PRRSV during 2020-2021[J]. Transbound Emerg Dis. 2022 Feb 19.
[2] Bao H , Li X . Emergence and spread of NADC34-like PRRSV in China[J]. Transboundary and Emerging Diseases, 2021.
[3] Sun YF, Liu Y, Yang J, et al. Recombination between NADC34-like and QYYZ-like strain of porcine reproductive and respiratory syndrome virus with high pathogenicity for piglets in China[J]. Transbound Emerg Dis. 2022 Feb 4.
[4] Li C, Gong B, Sun Q, et al. First Detection of NADC34-like PRRSV as a Main Epidemic Strain on a Large Farm in China[J]. Pathogens. 2021 Dec 29;11(1):32
[5] Cva B , Jmsa C , Ms D , et al. Assessing the litter level agreement of RT-PCR results for porcine reproductive and respiratory syndrome virus in testicles, tails and udder wipes diagnostic samples relative to serum from piglets - ScienceDirect[J]. Preventive Veterinary Medicine, 2020, 186.