猪流行性腹泻是一种以腹泻、呕吐、脱水和对哺乳仔猪高致死率为主要特征的高度接触性肠道传染病，PEDV是其主要病原。PEDV在空气中传播的可能性较低，主要通过接触传播和母仔间垂直传播。PEDV能通过病猪排泄的粪便散毒，从而污染饲料、饮水和环境。因此，易感猪群接触感染猪只或被污染的饲料、饮水、物质都可导致发病。

PEDV在环境中存活的时间超过9个月，很容易通过猪场物品的流动，而感染新生仔猪等易感猪群，从而导致疫病的爆发。PEDV在环境中的存在对猪群健康具有重大危害。完善的生物安全措施对于防控PEDV具有非常重大意义，许多猪场建立了相关生物安全制度，但是执行和落实情况没有进行评价，而且生物安全上的漏洞不得而知，这些问题的存在最终将导致疫病在猪场的反复发作，从而严重影响猪场效益。因此建立生物安全评价机制，通过检测对猪场生物安全措施进行监测，评价生物安全执行和落实情况，查找猪场生物安全漏洞，从而为建立健全、牢固的生物安全制度奠定基础。

一．腹泻场生物安全监测

1.1猪场背景

湖南某猪场母猪存栏1.2万头，两点式生产，猪场蓝耳双阴性，伪狂犬阴性。

2018年2月1日开始发生大面积腹泻；

2月3日母猪普免某厂家腹泻病毒灭活疫苗；

2月6日全群第一次返饲；

2月11日全群第二次返饲；

2月14日开始呈零星散发且仔猪发病时间推后到出生1周后；

2月23日后产出的仔猪至3月12日在这17天时间都是稳定的；

3月13日是下午开始出现呕吐和个别腹泻。

母猪群现在执行产前40天跟胎腹泻活疫苗，产前20天跟胎灭活疫苗。

图1：部分腹泻猪扎堆，仔猪排黄色粪便

1.2监测过程

1.2.1腹泻病毒确定

检测样本：2018年2月9号送检样品17份脐带血、3份仔猪肠道组织10份母猪唾液、10份母猪粪便。检测CSFV、PRRSV、PCV-2、PRV、PEDV、TGEV、PoRV病原。

1.2.2 三次连续监测生物安全
2018年2月9号-2018年3月16日，该猪场送检3批环境拭子，检测PEDV病毒载量，样品采集区域及检测结果（见1.3.1附表）。

部分送检样品

1.3检测结果

1.3.1腹泻病原检测结果

脐带血、仔猪肠道组织、唾液、粪便检测结果

PEDV实时荧光定量PCR

荧光定量PCR检测Ct值

注：Ct值小于35判定为“+”，大于35判定为“-”。本次进行的检测项目中CSFV、PRRSV、PCV-2、TGEV均为阴性，其Ct值没有列出。
在脐带血、肠道组织、唾液、粪便中检测到存在PEDV变异株、PRV野毒、PoRV病毒。肠道中的PRV野毒检测Ct值34.57与判定标准35非常接近，故而认为无危害；肠道中PoRV Ct值30.27，且只有一份肠道检测到，故而认为危害较小。综合判定本次腹泻爆发原因为：PEDV变异株。  

1.3.2 三次连续监测生物安全结果（PEDV）

注：Ct值小于35判定为“+”，Ct值大于“35”判定为“-”。Ct值越大表示病毒载量越低。
2月9日初步评估时，该猪场已经发生腹泻，在产产床含有高载量PEDV病毒，同时鞋底含有PEDV病毒，说明猪场生物安全存在漏洞，存在散毒风险；

2月25日进行整改前，该场已经进行了2轮返饲，检测结果显示，猪场存在大面积散毒，其中门卫室、水源、转猪场轮胎、清洗后头发均显示PEDV阳性，说明猪场进行返饲后，生物安全存在巨大漏洞，导致猪场全方位散毒；

3月16日整改后，除少数区域外，大部分区域病毒已转为阴性，说明该猪场进行的生物安全措施整改非常有效。

二．猪场整改及整改后生物安全监测

2.1整改措施

2018年2月26日，该场在获得检测结果后，发现猪场在进行第一次的处理后，生物安全依然存在漏洞，立即启动相关整改措施。

2.1.1 所有人员、物质、车辆进出场生物安全制度必须严格落实，请各位管理人员严格监督落实，抓到一个处理一个，绝不姑息。

2.1.2 即日起进行全场泼洒石灰水消毒，场区外道路洒烧碱水消毒。

2.1.3 门卫室及周边区域、洗消室及周边区域要求每天进行消毒，并每天更换消毒池消毒液。

2.1.4 员工进出猪舍工作服及水鞋，严格按制度落实。

2.1.5 仔猪转群及病死猪处理车辆专车专用。

2.1.6 一二期生产人员（包括水电及后勤部门）无重要事项，不得相互窜，否则将处以200元/次罚款。

2.1.7 二期的门卫消毒及洗澡施设，限期在10日内完成，门卫到场后污水处理厂及其他外来人员统一在门卫就餐。

该场内部整改措施通知

三．监测结论

3.1确定腹泻病原。本案例中送检的脐带血、组织、唾液、粪便均含有PEDV病毒，说明造成本次腹泻的病原是PEDV变异株。

3.2本案例通过实验室监测，帮助猪场成功查找到生物安全上的漏洞，并为最终帮助猪场降低PEDV病毒在环境中的载量，和建立健全的生物安全制度提供了基础。该场查找到的生物安全漏洞主要有：产房消毒不彻底、工作人员协鞋子携带病毒、转猪车消毒不彻底、工作人员窜场导致感染范围扩大、工作人员清洗体表不彻底等，最终该猪场严格执行和落实生物安全措施，经过约1个月的整改，猪场环境病毒载量大大下降，除部分区域外，大部分区域PEDV转为阴性。

四．讨论

腹泻和蓝耳是目前造成猪场重大疫病，往往给猪场造成巨大经济损失。猪场为防控疫病建立了相关的生物安全制度，但许多猪场的执行情况并不理想，导致蓝耳和腹泻的反复爆发。因此评价猪场生物安全措施的执行情况，查找生物安全漏洞，具有非常现实的价值。

对于阴性场而言，外部生物安全显得尤为重要，转猪车轮胎、饲料、人员等都需要纳入监控；对于疫病爆发场，内部和外部生物安全都非常重要，内部的生物安全对于控制和降低环境病毒载量、限制病毒感染范围具有巨大价值，外部生物安全对于公共生物安全、降低病毒在不同猪场的循环传播，具有重要意义。

 附表：猪场生物安全监测采样表

 注：此表仅供参考，具体采样情况需要结合猪场实际。

数据来源：湖南国测检测技术有限公司

作者：蔡行、廖娟红、冯静、曾焕、喻恒军、陈家锃 

目前新南方国测第三方猪病检测中心实验室，可开展脐带血检测、病原检测、血清抗体检测、微生物检测、水质检测、霉菌毒素检测等，欢迎广大养殖户朋友联系送检。

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