本期我们将主要对实验室检测方法原理及操作抗体部分进行认识。在理解抗原抗体相互作用原理的基础上，了解如何使用ELISA和胶体金等方法进行检测。

〖 抗原抗体 〗

1、抗原抗体的认识

抗原(antigen,Ag)是指能与T细胞、B细胞抗原受体或抗体特异性结合，具有启动免疫应答潜能的物质。抗原分子表面具有特殊立体构型和免疫活性的化学基团或区域称为抗原决定簇,又称抗原表位(Epitope)。机体的免疫应答针对的是抗原表位，它们也是与抗体相结合的部位，我们又称为抗原表位。

抗体(Ig)是由抗原刺激机体免疫系统后产生，并能与相应抗原发生特异性结合的物质。抗体具有空间结构，也具有抗原决定簇，还可被其他蛋白(如二抗)结合。

五种抗体的基本结构

  2、抗原抗体的一些蛋白质性质

1. 抗原和抗体均属于蛋白质；

2. 蛋白质之间存在相互作用，抗原和抗体的结合本质上属于蛋白质的相互作用；

3. 所有的蛋白都具有空间结构；

4. 任何蛋白质均是一种抗原，抗原和抗体是相对的概念。

〖 ELISA(酶联免疫吸附实验) 〗

1、ELISA(酶联免疫吸附实验)的介绍 

ELISA是在免疫酶技术的基础上发展起来的，它将抗原抗体的结合反应与酶反应的敏感性相结合，在抗原抗体结合的过程中通过在抗原或抗体上标记酶，酶和底物的结合使反应液吸光值发生改变，吸光值可被机器识别，机器将吸光值的变化经公式转化为数字信号，ELISA被广泛应用在液体样本中的病原、抗体、激素等有机物质的测定中。

2、ELISA的分类

3、ELISA的原理

它采用抗原与抗体的特异反应将待测物与酶连接，然后通过酶与底物产生颜色反应，用于定量测定。测定的对象可以是抗体也可以是抗原。

在这种测定方法中有3种必要的试剂：

①固相的抗原或抗体（免疫吸附剂） 

②酶标记的抗原或抗体（标记物）

③酶作用的底物（显色剂）

利用ELISA测量时，抗原（抗体）先结合在固相载体上，免疫活性保留，加入一种抗体（抗原）与酶结合成的偶联物（标记物），此偶联物也保留其原免疫活性与酶活性，当二者反应结合后，被酶催化水解或氧化还原而呈颜色。其所生成的颜色深浅与欲测的抗原（抗体）含量成正比。 生成产物可用肉眼、光学显微镜观察，也可以用分光光度计（酶标仪）加以测定，简单迅速，特异性强。

〖 胶体金技术 〗

1、胶体金的介绍

免疫胶体金技术是以胶体金作为示踪标志物应用于抗原抗体的一种新型的免疫标记技术。所应用的胶体金颗粒由一个基础金核即金原子与包围在外的离子层构成，离子层为氯金酸负离子，外层为H+，分散在溶液中，呈球形(小颗粒)或椭圆形(大颗粒)。

2、胶体金试纸的结构图

3、胶体金试纸的结果判断

4、胶体金技术的优缺点

优点：

• 操作非常简单，不需要额外仪器
  

• 反应迅速，一般在5min内出结果

• 适合对激素类物质进行快速定

缺点：

• 大多只能定性，仅可判断阴阳性
  

• 可用于检测抗体，但无法数据化

• 缺少畜禽行业标准,质量参差不齐

• 仅适用体液检测，病原检测敏感性差 

《实验室检测方法原理及操作抗体部分》主要介绍了抗原抗体的本质和结构，在了解抗原抗体的基础上提出实验室对其进行检测的一些方法，如ELISA和胶体金，对ELISA和胶体金的测定原理进行阐释并分析利弊，帮助选择合适的抗原抗体检测方法。

更多实验室抗体检测内容请于周四上午10点准时收看哼哼百事通~